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técnicas de analises de biologia
Tipologia: Notas de aula
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➪Análise bioquímica
célula
⤷Aa células são colocadas num (?), que vão sofrer uma pressão pra que passe por um orifício pequeno capaz de romper a ⤷ Por friquicao friquissao?
bolinhas de resina (não visíveis a olho nu) chamadas de beeds que irão preencher toda a coluna lã de vidro para não passar as bolinhas, só o líquido ⤷ o líquido vai passar pela a coluna (fase móvel) ⤷ A resina fica (fase fixa) ⤷ Diferentes proteínas passando, descendo junto ao líquido pela força da gravidade. As proteínas que de alguma forma que interagem com a fase estacionária, levam mais tempo para sair. Já as que não interagem, saem primeiro Tipos de cromatografia:
⤷ Uma coluna com beads positivo, as proteínas negativas vão interagir com a resina, então irão demorar muito mais que com as proteínas de carga positiva ⤷ Tem proteínas totalmente positiva, totalmente negativa e meio a meio ⤷ Vai alterando a concentração de sais ⤷ Há proteínas com mesma caraga, então pode ter contaminantes, então usa outra
com ionsbdo tampão ?) ou sal, que vai fazer com que a proteína mude a confirmação, afetando a afinidade com o anticorpo e o complexo anticorpo proteína é desfeito. Então, vai recolher a proteína sozinha
em água ⤷ centrífuga duas fases: aquosa (ácidos nucléicos) e fase fenólica (proteínas são desnaturadas pelo fenol)