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Guias e Dicas
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Roteiro de RCPtns, Notas de aula de Bioquímica

Roteiro de Aula Prática de Reações Coradas de Proteínas

Tipologia: Notas de aula

2011

Compartilhado em 29/03/2011

karita-souza-4
karita-souza-4 🇧🇷

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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA - REAÇÕES CORADAS DE PROTEÍNAS
FUNDAMENTO: As reações coradas são devidas à presença na molécula protéica de
determinados resíduos de aminoácidos (Radicais R) e devido à presença de ligações peptídicas.
Empregar na execução da prática, solução a 5% de ovoalbumina, gelatina e peptona para todas
as reações e observar as colorações desenvolvidas.
1. REAÇÃO XANTOPRPOTEICA – Aminoácidos responsáveis: Tir; Fen; Trp
Técnica: Em um tudo de ensaio colocar:
1,5mL de solução protéica a 5%
0,5mL de HNO3 concentrado
Aquecer cuidadosamente até a fervura por 1 minuto
Observar a cor
Esfriar e adicionar gota NaOH 1:1 até alcalinizar o meio
Observar a mudança de cor
2. REAÇÃO DE HOPKINS COLE – Aminoácido responsável: Trp
Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:
1mL de solução protéica a 5%
1mL de ácido glioxílico ou ácido acético de fermentação
Misturar bem e adicionar cuidadosamente pela parede, com o tubo inclinado, 1mL de
H2SO4 concentrado (Técnica do Anel)
Observar a cor do anel
3. REAÇÃO DE SAKAGUSHI: Aminoácido responsável: Arg
Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:
1,5mL de solução protéica a 5%
0,5mL de solução de NaOH a 5%
2 gotas de solução de α-Naftol a 1% em álcool etílico
2 gotas de hipoclorito de sódio aproximadamente 10%
Agitar bem
Observar a cor
4. REAÇÃO DE PAULYAminoácidos responsáveis: Tir; His
Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:
1mL de ácido sulfanílico a 1% em HCl 10%
1mL de nitrito de sódio a 5%
Misturar bem e depois de 1 minuto adicionar 1mL de solução protéica a 5%
Misturar bem
Colocar solução diluída de Na2CO3 até alcanilizar o meio
Observar a mudança de cor
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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA - REAÇÕES CORADAS DE PROTEÍNAS

FUNDAMENTO : As reações coradas são devidas à presença na molécula protéica de determinados resíduos de aminoácidos (Radicais R) e devido à presença de ligações peptídicas.

Empregar na execução da prática, solução a 5% de ovoalbumina, gelatina e peptona para todas as reações e observar as colorações desenvolvidas.

  1. REAÇÃO XANTOPRPOTEICA – Aminoácidos responsáveis: Tir; Fen; Trp

Técnica : Em um tudo de ensaio colocar:

  • 1,5mL de solução protéica a 5%
  • 0,5mL de HNO 3 concentrado
  • Aquecer cuidadosamente até a fervura por 1 minuto
  • Observar a cor
  • (^) Esfriar e adicionar gota NaOH 1:1 até alcalinizar o meio
  • Observar a mudança de cor
  1. (^) REAÇÃO DE HOPKINS COLE – Aminoácido responsável: Trp

Técnica : Em um tubo de ensaio colocar:

  • (^) 1mL de solução protéica a 5%
  • 1mL de ácido glioxílico ou ácido acético de fermentação
  • Misturar bem e adicionar cuidadosamente pela parede, com o tubo inclinado, 1mL de H 2 SO 4 concentrado (Técnica do Anel)
  • Observar a cor do anel
  1. REAÇÃO DE SAKAGUSHI : Aminoácido responsável: Arg

Técnica : Em um tubo de ensaio colocar:

  • 1,5mL de solução protéica a 5%
  • 0,5mL de solução de NaOH a 5%
  • 2 gotas de solução de α-Naftol a 1% em álcool etílico
  • 2 gotas de hipoclorito de sódio aproximadamente 10%
  • Agitar bem
  • Observar a cor
  1. REAÇÃO DE PAULY – Aminoácidos responsáveis: Tir; His

Técnica : Em um tubo de ensaio colocar:

  • 1mL de ácido sulfanílico a 1% em HCl 10%
  • 1mL de nitrito de sódio a 5%
  • Misturar bem e depois de 1 minuto adicionar 1mL de solução protéica a 5%
  • Misturar bem
  • Colocar solução diluída de Na 2 CO 3 até alcanilizar o meio
  • Observar a mudança de cor
  1. REAÇÃO DE BIURETO – Grupamentos responsáveis: - CONH 2 com outros grupos como: - CONH 2 ; CSNH 2 ; CRNH 2 , etc

Técnica : Em um tubo de ensaio colocar:

  • 1,5mL da solução protéica a 5%
  • 0,5mL de solução de NaOH 2,5N
  • 2 gotas de CuSO 4 a 1%
  • Observar a cor

Anotar o que você observou na execução das reações:

Xantoproteica Hopkins- Cole

Sakagushi Pauly Biureto

Ovoalbumina + Amarelo Ouro

+ Anel Violeta

+ Alaranjado + Laranja + Violeta

Gelatina + Amarelo Claro

Não forma Anel

+ Castanho + Castanho Alaranjado

+ Violeta

Peptona + Amarelo Claro

+ Anel Violeta

+ Alaranjado + Avermelhado

+ Violeta