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Guias e Dicas
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Relatório de Pratica de microbiologia, Esquemas de Microbiologia

Relatorio de Pratica de microbiologia

Tipologia: Esquemas

2021

Compartilhado em 27/09/2021

indy-prado-costa
indy-prado-costa 🇧🇷

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FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE
CLEILDE PRADO COSTA
NICHOLAS RODRIGUES MACEDO
PEDRO HENRIQUE DE OLIVEIRA
SILVA YURI MOREIRA ROCHA
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA
Aula Prática 4– Identificação e microcultivo fúngico
Vitória da Conquista -BA
2021
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FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE

CLEILDE PRADO COSTA

NICHOLAS RODRIGUES MACEDO

PEDRO HENRIQUE DE OLIVEIRA

SILVA YURI MOREIRA ROCHA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

Aula Prática 4– Identificação e microcultivo fúngico Vitória da Conquista -BA 2021

CLEILDE PRADO COSTA

NICHOLAS RODRIGUES MACEDO

PEDRO HENRIQUE DE OLIVEIRA SILVA

YURI MOREIRA ROCHA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

Aula Prática 4–Identificação e microcultivo fúngico Relatório apresentado, à Professora MSª Aline Amorim como parte dos requisitos necessários para a obtenção resultados; adquiridos por meio experimentos realizados na aula prática Laboratorial. Orientador(a): Aline Amorim m Vitória da Conquista -BA 2021

Os fungos são seres eucariontes heterotróficos; unicelulares ou multicelulares; microscópicos ou macroscópicos; com reprodução assexuada ou sexuada, resultando, neste último caso, na formação de esporos. Os fungos possuem parede celular constituída por quitina e glucano. Estes organismos se alimentam por absorção e apresentam glicogênio ou lipídeos como material de reserva energética [1]. Fungos filamentosos apresentam o talo formado por hifas que, em conjunto, formam o micélio. A reprodução assexuada destes organismos se dá por fragmentação, ou pela produção de esporos, que são dispersos pelo vento e pela água. Fungos filamentosos, ou bolores, normalmente, não fazem parte da microbiota animal e, portanto, o homem não é um reservatório importante para esse grupo de fungos. As portas de entrada no hospedeiro são vias aéreas superiores ou quebra na barreira epidérmica após traumatismos com objetos perfurocortantes [1]. Esses conceitos são fundamentais para a identificação dos fungos, e também deve ser levado em consideração características macroscópicas (cor, forma, textura da colônia). Algumas espécies são patógenos de seres humanos, causando doenças conhecidas como micoses, e as portas de entrada no hospedeiro são as vias aéreas superiores ou quebra na barreira epidérmica após traumatismos[2]. Dentre as centenas de espécies descritas de leveduras, as do gênero Candida são os maiores agentes de infecção, e de fungos filamentosos temos o gênero Aspergillus spp, ambos agentes oportunistas. Diante dessas condições, torna- se indispensável a aplicação de exames micológicos, baseados em análise macro e microscópicas e provas bioquímicas, a fim de identificar o patógeno e indicar a terapia mais adequada ao paciente[2].

2. Materiais e Métodos: ● Placa com o fungo Aspergilus niger ● Placa com o fungo crescido do ambiente ● Placas com os microcultivos do Aspergillus niger ● Lâminas ● Lamínulas ● Pinça ● Azul de lactofenol ● Pipeta pasteur

● Placas com Ágar Sabouraud ● Algodão ● Alça de platina 2.1 Métodos – como preparar o microcultivo Fungo O fungo Aspergillus niger foi o microrganismo escolhido para o trabalho. O mesmo foi fornecido pelo laboratório de microbiologia da Fainor.

  1. Colocou - se sobre uma lâmina esterilizada, contida em uma placa de Petri estéril, um cubo de ágar Sabouraud e ágar batata.
  2. A lâmina deve estar sobre um suporte, que pode ser formado por outra lâmina, ou um pequeno bastão de vidro recurvado, ou ainda, dois palitos de fósforo.
  3. Semeou o fungo, a partir de repique recente, nos quatro lados do cubo de ágar. Recobrir com uma lamínula esterilizada.
  4. Fez- se uma câmara úmida embebendo um pequeno chumaço de algodão estéril com agua ou salina estéril, para evitar a dessecação do meio de cultura, durante o crescimento do fungo.
  5. Tapou a placa e deixou à temperatura ambiente por 7 a 10 dias, até que se observe desenvolvimento de hifas com ou sem pigmentação.
  6. Retirou a lamínula com auxílio de uma pinça, cuidadosamente, uma vez que nela deverão estar aderidas as hifas e esporos do fungo.
  7. Pingou uma gota de corante azul de lactofenol e montou sobre uma lâmina.
  8. Desprezou o cubo de ágar e, em seu lugar, pingou outra gota de corante azul e cobrir com lamínula, para visualizar esporos e hifas também aderidos à lâmina.
  9. Observou em microscópio com objetiva de 40X, o tipo e cor da hifa, forma disposição e formação de esporos. 3. Resultados e Discussão Foram inoculadas em placas contendo meio BDA. Em seguida, as placas foram incubadas em câmara úmida a ± 25 °C por período de 1 a 3 dias com a finalidade de estimular a esporulação. Após a esporulação foi efetuada a identificação do fungo

potencial genético para produção de enzimas hidrolíticas, especialmente células, que têm grande aplicação em biotecnologia.

1. Anotar as características macroscópicas das colônias dos fungos que cresceram nos diferentes testes. Foi o Bolor hifas e micélio e Levedura**.

  1. Observar as lâminas ao microscópio, descrevendo a característica** microscópica dos fungos visualizados. Forma irregulares, circulares ; Filamentos ; Superfície com margens altas; coloração verdeadas , aspecto úmido; Tamanho médio. Brotamento / fissão binária 3. Qual o princípio da técnica de microcultivo? Com qual finalidade ela é feita? O microcultivo (ou cultivo em lâmina) é empregada por alguns taxonomistas de fungos. Esta técnica consiste na preparação de culturas de fungos em lâminas de microscopia para observação direta em microscópio de campo claro. O microcultivo permite na íntegra o estudo das estruturas de reprodução (tanto sexuadas quanto assexuadas) da maioria dos fungos; facilitando a observação das principais características utilizadas para identificar tais micro-organismos. Vários protocolos foram estabelecidos para tal técnica. Referências Bibliográficas: 1. GPI Cursos - Teresina-PI - CNPJ:14.378.615/0001-60 Registro: http://gpicursos.com/interagin/gestor/trabalhos/trabalho-pdf.php?id= 2. https://www.trabalhosfeitos.com/document/ 3. https://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/rede_rm/cursos/ boas_praticas/m odulo3/identificacao.htm . Anexos:

Anexos 1- Característica morfológica do A. niger. Anexos 2-Cultivo do Aspergillus níger em meio BDA. Anexos3- Cultivo do Aspergillus niger em meio BDA inclinado. Anexos 4 - Repicagem do disco. Anexos 5 - Inoculação do disco.