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Guias e Dicas
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fluorimetria, Notas de estudo de Farmácia

Fluorimetria

Tipologia: Notas de estudo

2010

Compartilhado em 14/10/2010

Mauricio_90
Mauricio_90 🇧🇷

4.5

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bg1
16/03/2010
1
Profa. Daniele Michelin
Moléculas que são levadas ao estado
excitado não podem nele permanecer e
devem necessariamente retornar ao
estado fundamental, perdendo o
excedente de energia.
Colisão com outras espécies
Relaxamento vibracional
Emissão de um fóton
Eletroluminescência: energia cinética de elétrons ou
íons acelerados por um campo elétrico é transferida a
átomos ou moléculas presentes em um gás provocando a
emissão de um fóton pelos átomos ou moléculas
excitados.
Quemiluminescência: reação química produz uma
espécie excitada que emite fóton de radiação paraatingir
o estado fundamental,mais estável e de menor energia.
Fotoluminescência: quando fótons são absorvidos por
moléculas promovendo-as aum estado excitado. Ao
retornar ao estado fundamental, as moléculas emitem
radiação.
Fluorescência
Fosforecência
Fluorescência: emissão de um fóton por uma espécie
que atingiu o estado excitado por meio de absorção de
radiação eletromagnética, ou seja, absorção de um
fóton.
Fosforescência: excitação provocada por radiação
eletromagnética, porém a emissão de radiação
continua após a excitação haver cessado.
A maior diferença entre fluorescência e fosforescência é o
tempo entre a absorção da energia e a emissão do fóton,
sendo que quando o intervalo de tempo é curto, o processo
é chamado fluorescência e quando o tempo é longo, o
processo chama-se fosforescência.
COMPOSTO
ORGÂNICO FLUORESCÊNCIA
Duplas conjugadas
Rigidez
Pares de elétrons n em heteroátomos - conjugação
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pf4

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Profa. Daniele Michelin

 Moléculas que são levadas ao estado

excitado não podem nele permanecer e

devem necessariamente retornar ao

estado fundamental, perdendo o

excedente de energia.

  • Colisão com outras espécies
  • Relaxamento vibracional
  • Emissão de um fóton
  • Eletroluminescência: energia cinética de elétrons ou íons acelerados por um campo elétrico é transferida a átomos ou moléculas presentes em um gás provocando a emissão de um fóton pelos átomos ou moléculas excitados.
  • Quemiluminescência: reação química produz uma espécie excitada que emite fóton de radiação para atingir o estado fundamental, mais estável e de menor energia.
  • Fotoluminescência: quando fótons são absorvidos por moléculas promovendo-as a um estado excitado. Ao retornar ao estado fundamental, as moléculas emitem radiação.  Fluorescência  Fosforecência  Fluorescência: emissão de um fóton por uma espécie que atingiu o estado excitado por meio de absorção de radiação eletromagnética, ou seja, absorção de um fóton.  Fosforescência: excitação provocada por radiação eletromagnética, porém a emissão de radiação continua após a excitação haver cessado. A maior diferença entre fluorescência e fosforescência é o tempo entre a absorção da energia e a emissão do fóton, sendo que quando o intervalo de tempo é curto, o processo é chamado fluorescência e quando o tempo é longo, o processo chama-se fosforescência. COMPOSTO ORGÂNICO FLUORESCÊNCIA  Duplas conjugadas  Rigidez  Pares de elétrons n em heteroátomos - conjugação

 Fluorescência: transição do primeiro estado

excitado para o estado fundamental.

  • Presença de conjugação: reduz a diferença de energia entre o estado fundamental e o primeiro estado excitado e confere maior estabilidade ao estado excitado.
  • Rigidez molecular: reduz a interação da molécula com o meio em que se encontra e a probabilidade de desativação por processo não emissivos.
  • Substituintes que doam elétrons aumentam a fluorescência.
  • Grupos que retiram elétrons diminuem ou eliminam fluorescência.

 Rigidez é, às vezes, conseguida por meio de

complexação com um metal de transição.

 A fluorescência pode ser obtida por meio

da formação de quelatos com metais (Mg,

Zn)

 Compostos não-fluorescentes podem,

muitas vezes, ser derivados quimicamente e

tornados fluorescentes com um reagente

fluorogênico.

EXISTÊNCIA / INTENSIDADE DA FLUORESCÊNCIA Estrutura da molécula: Duplas conjugadas  Rigidez  Pares de elétrons n em heteroátomos - conjugação Ambiente:  Temperatura  Solvente  ph do meio  Presença de impurezas  Concentração da espécie fluorescente

 FLUORÍMETRO: mede a fluorescência

  • Fonte (lâmpada de xenônio, hidrogênio, deutério)
  • Monocromador (filtros, primas ou redes)
  • Cubeta (quartzo ou silica fundida)
  • Detector (faixa visível – tubo fotomultiplicador)

 FLUORÍMETRO

  • Fotofluorímetro
  • Espectrofluorímetro

ALTA

SENSIBILIDADE

(partes por trilhão)

ALTA

ESPECIFICIDADE

(fluorescência)