Docsity
Docsity

Prepara tus exámenes
Prepara tus exámenes

Prepara tus exámenes y mejora tus resultados gracias a la gran cantidad de recursos disponibles en Docsity


Consigue puntos base para descargar
Consigue puntos base para descargar

Gana puntos ayudando a otros estudiantes o consíguelos activando un Plan Premium


Orientación Universidad
Orientación Universidad

Práctica3_Validación de medios de cultivo solidos por método ecométrico., Exámenes de Microbiología

Práctica de laboratorio sobre Validación de medios de cultivo solidos por método ecométrico.

Tipo: Exámenes

2020/2021

A la venta desde 25/08/2021

alexia-sainz-oseguera
alexia-sainz-oseguera 🇲🇽

10 documentos

1 / 12

Toggle sidebar

Esta página no es visible en la vista previa

¡No te pierdas las partes importantes!

bg1
1
Universidad Tecnológica de
Morelia.
Módulo:
Microbiología.
Grupo:
Biotecnologa 3A
Actividad:
7. Actividad 7. Práctica 3_Validación de medios de
cultivo solidos por método ecométrico.
Objetivo de la practica:
Que el alumno conozca la importancia de la validacin
de los medios de cultivo como control de calidad.
Alumna:
Alexia Sainz Oseguera.
Docente:
Alma Teresa Miranda Quiroz.
pf3
pf4
pf5
pf8
pf9
pfa

Vista previa parcial del texto

¡Descarga Práctica3_Validación de medios de cultivo solidos por método ecométrico. y más Exámenes en PDF de Microbiología solo en Docsity!

Universidad Tecnológica de

Morelia.

Módulo:

Microbiología.

Grupo:

Biotecnologí a 3A

Actividad:

7. Actividad 7. Práctica 3_Validación de medios de

cultivo solidos por método ecométrico.

Objetivo de la practica:

Que el alumno conozca la importancia de la validaci ó n

de los medios de cultivo como control de calidad.

Alumna:

Alexia Sainz Oseguera.

Docente :

Alma Teresa Miranda Quiroz.

Fecha de entrega: 11 de jun. de 21.

REVISIÓN DE CONCEPTOS PREVIOS.

Medio de cultivo.

Es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. La diversidad metab ó lica de estos es tan grande que la variedad de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos, ni siquiera refiriendonos a las bacterias con exclusividad. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Existen rangos de temperatura dónde la tasa máxima de crecimiento se encuentra entre 20 y 42 °C. A esas bacterias se las conoce como mesófilas.

Crecimiento microbiano.

Es el aumento del número de microorganismos a lo largo del tiempo. Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un único microorganismo (ciclo celular), sino al demográfico. El crecimiento de una población es el aumento del número de células como consecuencia de un crecimiento individual y posterior división.

Mé todo ecom é trico.

El método de Mossel es semi-cuantitativo y se realiza tomando un medio de cultivo sólido y se divide en cuatro cuadrantes. Se realizan cinco estrías en cada cuadrante y una en el centro de los cuadrantes.

DESCRIPCIÓN E IMAGEN DEL MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPOS A

UTILIZAR EN LA PRÁCTICA Y LA FUNCIÓN DE CADA UNO DE ELLOS.

Materiales Reactivos Equipo

Matraces erlenmeyer 250 ml: suele utilizarse para calentar sustancias a temperaturas altas aunque no vigorosamente; la segunda tarea suele delegarse al balón de destilación. Agar mé todos está ndar : está recomendado por APHA para el recuento de bacterias de interés sanitario, que son indicadores de contaminación o carga microbiana en alimentos. Balanza analí tica: es una bá scula que mide masa con un alto grado de precisió n. Tí picamente tienen un rango de pesaje entre los 100 y los 300 g, y una lectura de 0,1 mg ( decimales), de 0,01 mg ( decimales. Probetas 100 ml : es un instrumento volumétrico, hecho de vidrio, que permite medir volúmenes fácilmente, rápidamente y con un ligero grado de inexactitud. También se utiliza para contener líquidos. Agar EMB: crecerán microorganismos de la familia Enterobacteriaceae y una diversidad de bacilos gram- negativos. Frecuentemente este medio no inhibe completamente los microorganismos gram-

positivos.

Autoclave: es un recipiente de presió n metá lico de paredes gruesas con un cierre hermé tico que permite trabajar a alta presió n para realizar una reacció n industrial, una cocci ó n o una esterilizació n con vapor de agua a fin de esterilizar materiales e instrumentos quirú rgicos.

Vasos pp 250 ml: es un recipiente de laboratorio, generalmente de vidrio, de forma cilí ndrica con un pico en el borde para facilitar el vertido de su contenido, se emplea para procesos de precipitació n, para calentar o agitar l íquidos, preparar disoluciones, etc. Escherichia coli : productora de toxina Shiga es una bacteria que puede causar graves enfermedades a través de los alimentos. El origen principal de los brotes de E. coli productora de toxina Shiga son los productos de carne picada cruda o poco cocinada, la leche cruda y las hortalizas contaminadas por materia fecal. Campana flujo laminar: son instrumentos que se utilizan principalmente para trabajar en ambientes libres de contaminació n microbioló gicas. Lá mparas de alcohol : nstrumento utilizado en laboratorios para calentar diversos lí quidos colocados sobre un tripie, tambié n se puede utilizar para generar una zona de asepsia o esterilizar asas en laboratorios de microbiologí a. Agar EC: es un medio de cultivo líquido selectivo. Este medio es recomendado por la Standard Methods para el recuento de coliformes totales y fecales, por la técnica del número más probable (NMP) en muestras de agua y alimentos, donde el principal agente involucrado es la Escherichia coli. Incubadora: es un dispositivo para controlar la temperatura, la humedad y otras condiciones en las que se está cultivando un cultivo microbiol ó gico. Las incubadoras simples son cajas aisladas con un calentador ajustable, que van normalmente hasta 65°C.

Tubos ensaye chicos: son instrumentos esenciales en un laboratorio. La mayorí a de los tubos de ensayo está n hechos de vidrio borosilicatado conocido tambié n como pyrex ya que son m á s resistentes a los cambios de temperatura y a los ataques quí micos. Micropipeta 1 ul Puntas: las micropipetas permiten emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechable s, de plástico, que habitualmente son estériles.

Asas bacterioló gicas: es un instrumento de laboratorio tipo pinza que consta de una base hecha de aluminio, y un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno platino que termina punta. Cajas petri: es un recipiente redondo de cristal, para que se pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma hermética.

Método ecométrico

1.Se dividen las placas en cuatro cuadrantes marcados de forma conveniente sobre la base de la caja de petri.

  1. Depositar el medio de cultivo a evaluar en una capa cuyo grosor deberá de ser de unos 4 mm.
  2. A partir de cada uno de los cultivos en fase exponencial (mantenidos en crecimiento toda la noche o 18 h), tomar con un asa y trazar sobre la superficie del medio cinco líneas paralelas a las dibujadas en cada cuadrante y una línea central de forma progresiva y sin recargar, retroceder o repisar o esterilizar el asa (fig. 3.1). Realizar lo mismo con el medio de referencia. 4.Incubar las placas en forma invertida por 24 h/30°C. 5.Transcurrido el tiempo efectuar la lectura de la caja, teniendo en cuenta que cada estría tiene un valor de 0.2 y la central de 1.
  3. Multiplicar por el número de estrías en los cuales se observa crecimiento absoluto (ICA), si hay crecimiento en las cinco estrías de los cuatro cuadrantes y la estría central (1) el ICA es igual a 5. El ICA es igual al número del cuadrante cuando todas las estrías de este y de los cuadrantes anteriores muestren un crecimiento completo, mientras que no se muestre crecimiento en ninguna estría del cuadrante siguiente.

7. Efectuar la misma operación con el medio de referencia. Una vez obtenida las

lecturas de cada medio ICA, sacar el índice de crecimiento relativo (ICR), comparando el ICA del medio de evaluación y el medio de referencia.

CUESTIONARIO

  1. ¿Cual es la importancia de la validació n de los medios de cultivo en microbiologí a? El desarrollo y realización de análisis de control microbiológico es una herramienta que tiene una repercusión decisiva en el ámbito del diagnóstico clínico, de la salud pública, de la tecnología alimentaria y del medio ambiente. En los últimos años las actividades relacionadas con la verificación y validación de métodos analíticos ha cobrado gran importancia debido por un lado al continuo desarrollo y actualización de técnicas y equipos analíticos cada vez más complejos, y por otro lado al interés de los profesionales en garantizar la calidad de sus procesos y resultados.
  2. ¿Qué mé todos se utilizan para la validació n de medios de cultivo? Normalizado: Este método está alineado a las exigencias estándares y es aplicado según lo prescrito en la norma. Debe cumplir estrictamente una serie de parámetros estadísticos tanto en ensayos cuantitativos como cualitativos. Modificado: Está fundamentalmente basado en un método normalizado pero por razones de tiempo – temperatura, equipos, medio de cultivo u otras razones, alguno de los parámetros ha sido alterado por lo que requiere mayor atención para evitar errores debido al cambio introducido. Alternativo: Es cuando el laboratorio posee otros medios para realizar una comprobación rápida pero eficaz del método. En este caso los datos son facilitados por parte del fabricante y evaluados por terceras partes. Interno: Es el más exigente en cuanto a validación de métodos. Este requiere una evaluación extensa de todos los parámetros posibles para garantizar que los resultados son estadísticamente válidos. Cuantitativo Cualitativo Recuento de microorganismos totales
  • Precisión (Repetibilidad + Precisión intermedia)
  • Límite de cuantificación
  • Rango validado
  • Incertidumbre de medición
  • Robustez Recuento de microorganismos en medio selectivo/diferencial
  • Sensibilidad
  • Especificidad
  • Inclusividad
  • Exclusividad
  • Límite de detección Sensibilidad
  • Especificidad
  • Inclusividad/ Exclusividad
  • Robustez