PRÁCTICA 06: EXTRACCIÓN DE ADN
6.1 INTRODUCCIÓN
Todo organismo vivo presente en nuestro planeta Tierra, contiene como material genético
responsable de la transmisión de los caracteres hereditarios al ácido desoxirribonucleico (ADN).
Se halla libre en el citosol en el caso de los procariotas y en el caso de las células eucariotas está
asociado a proteínas básicas (histonas y protaminas) formando la cromatina en el interior de una
estructura denominada núcleo.
El ADN, almacena las instrucciones necesarias para que un organismo se desarrolle y se adapte a
su entorno. Estas instrucciones son replicadas durante el proceso de división celular para ser
distribuidas entre las células hijas. Además, estas instrucciones son transcritas a otro tipo de
ácido nucleico, llamado ácido ribonucleico (ARN) en el cual la adenina del ADN es transcrita
como uracilo. Este ARN es el que al final es traducido a proteínas en el citosol, con la
participación de una nanoestructura biológica, el ribosoma (ribonucleoproteína) que traduce el
idioma de los nucleótidos (ácidos nucleicos) al idioma de los aminoácidos (proteínas).
Entonces el ADN, almacena esa información que hace posible la construcción de un organismo.
Para el estudio de su composición y características fisicoquímicas se han desarrollado diversas
técnicas que permiten su identificación. Donde su característica ácida y su comportamiento en
solventes orgánicos son considerados para el desarrollo de estas técnicas. Cabe resaltar que la
calidad de ADN extraído es crucial para aplicar diversas técnicas moleculares.
En eucariotas, el ADN, se halla en el interior de la envoltura nuclear y este a su vez en el interior
de la membrana celular, ambas tienen como principal componente a los fosfolípidos entonces
¿qué sustancia podríamos usar para disgregar a la carioteca y a la membrana celular? A su vez
tenemos en el citoplasma organelas como lisosomas (que poseen una variedad de enzimas
hidrolíticas) y enzimas con actividad nucleasa, que pueden digerir el ADN liberado ¿Qué
sustancias podríamos usar para poder inactivar estas enzimas? Recordemos que este ADN
eucariota se halla asociado a proteínas, entonces también tenemos que separarlos ¿Cómo lo
haríamos? Ahora tengamos en cuenta que se trata del ADN de una célula vegetal donde la rígida
y fuerte pared celular está presente ¿qué haríamos para poder romperla?
La extracción del ADN comprende diversas etapas, en forma secuencial se tiene:
-Liberar el ADN en forma soluble por medio de la destrucción de la pared celular y de los
sistemas membranosos de las células (membrana celular y carioteca).
-Separar los complejos de nucleoproteína por desnaturalización de la parte proteica y
protección del ADN.
-Separación del ADN de las otras macromoléculas por solubilidad diferencial.
-Eliminación de ARN mediante reacción enzimática.
-Precipitación del ADN por insolubilidad en alcohol y bajas temperaturas.
6.2 ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE
-Comprobar la presencia de ácidos nucleicos en muestras biológicas de tejido vegetal
6.3 FUNDAMENTO
El procedimiento inicia con la trituración del tejido, seguidamente se lisan las células
mediante un detergente, vaciándose su contenido molecular en una disolución tampón en
la que se disuelve el ADN. Las cargas negativas del ADN atraen los iones salinos permitiendo
su disolución y posterior extracción de la célula. El detergente a su vez fracciona las
