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GUIA DE PROCEDIMIENTO-PRACTICAS DE BIOQUIMICA 2025
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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La BIOSEGURIDAD, según OMS (2005), se define como el conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biológicos, físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos, asegurando que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra la salud y seguridad de trabajadores de la salud, pacientes, visitantes y el medio ambiente II. OBJETIVOS:
● Informa al profesor del material roto o averiado. ● Fíjate en los signos de peligrosidad que aparecen en los frascos de los productos químicos. ● Lávate las manos con jabón después de tocar cualquier producto químico. ● Al acabar la práctica, limpia y ordena el material utilizado. ● Si te salpicas accidentalmente, lava la zona afectada con agua abundante. Si salpicas la mesa, límpiala con agua y sécala después con un paño. ● Evita el contacto con fuentes de calor. No manipules cerca de ellas sustancias inflamables. Para sujetar el instrumental de vidrio y retirarlo del fuego, utiliza pinzas de madera. Cuando calientes los tubos de ensayo con la ayuda de dichas pinzas, procura darles cierta inclinación. Nunca mires directamente al interior del tubo por su abertura ni dirijas esta hacia algún compañero. SEÑALES DE SEGURIDAD De Prohibición: Redondas, con pictograma de color negro sobre fondo blanco, con bordes y banda transversal de izquierda a derecha. Contra Incendios: Rectangulares o cuadrangulares, con pictograma blanco sobre fondo rojo. De Advertencia: Triangulares, con pictogramas de color negro y fondo amarillo o naranja. De Seguridad: Rectangulares o cuadrangulares, con pictogramas de color blanco y fondo verde. De Obligación: Circulares y con pictogramas de color blanco con fondo azul.
Un amortiguador es un compuesto que tiende a mantener una solución a un pH constante capturando o liberando H+^ en respuesta a cambios pequeños en la concentración H+. Si la concentración de H+^ aumenta, los amortiguadores se combinan entre ellos; si la concentración de H+^ baja. Los amortiguadores liberan H+. El resultado es que la concentración de H+^ vuelve a su nivel original. Entre los amortiguadores que pueden hallarse en los organismos vivos están el bicarbonato HCO 3 y el fo 2 sfato H P 4 O
En ambos casos el resultado es que el pH de la sangre se mantiene cerca de su valor normal. El intervalo del pH para la sangre arterial se representa así: El intervalo del pH en la sangre arterial compatible con la vida es relativamente estrecho: de aproximadamente 6.8 a 7.8. En el adulto sano el pH está entre 7.35 y 7.45. El intervalo del pH para la sangre arterial se representa así:
La célula se considera como un biosistema altamente organizado en el cual interactúan un conjunto de fenómenos físicos y químicos complejos que permiten a la estructura viviente mantener una interrelación iónica y molecular con su entorno por la semipermeabilidad de la membrana celular.
1. DIFUSIÓN: Es un proceso físico de gran importancia en el equilibro molecular de la célula con el medio extracelular. La membrana celular permite la difusión de moléculas hidrofóbicas, iones, aminoácidos, monosacáridos, etc., gracias a sus proteínas transportadoras, las mismas que permiten el pasaje de los solutos a velocidades diferentes debido al peso molecular y carga de éstos. En la célula se realiza DIFUSIÓN SIMPLE (sin gasto de ATP y con velocidad de pasaje siempre proporcional), la DIFUSIÓN FACILITADA O TRANSPORTE PASIVO (sin gasto de ATP y con velocidad de pasaje tope o máxima) y el TRANSPORTE ACTIVO (con gasto de ATP). 2. DIALISIS: Fenómeno físico en que los cristaloides son separados de las proteínas en virtud de sus tasas diferenciales de difusión a través de una membrana semipermeable. Algunos autores denominan diálisis a la difusión pasiva de sustancias a través de una membrana semipermeable artificial, limitando la denominación de HEMODIÁLISIS al proceso físico vital realizado en vertebrados a nivel de glomérulo renal en donde la sangre es depurada de sus sustancias de desecho conllevando a la formación de un filtrado de cristaloides que después originarán la orina. 3. OSMOSIS: Es la difusión de agua a través de la membrana citoplasmática semipermeable como respuesta a la diferencia de concentración salina entre la célula y su entorno. El ingreso de agua a la célula se denomina endósmosis originando un aumento en el volumen celular (llamándose hemólisis y turgencia en células animales y vegetales, respectivamente); el pasaje contrario es exósmosis, induciendo la pérdida de volumen en la célula (crenación y plasmólisis en células vegetales, respectivamente).
· Preparamos una solución salina isotónica con cloruro sódico (sal común) al 9 por 1000 en agua destilada (es decir, 9 g de NaCl en cada 1000 de disolución); una solución salina hipotónica, sólo con agua destilada; y una solución salina hipertónica, con NaCl al 18 por 1000. Cada una en un pequeño tubo de ensayo. · Diluimos una gota de sangre en 5 ml de cada una de estas disoluciones, y a los 5 min. observamos muestras de las tres al microscopio: Sólo en la muestra con solución salina isotónica se verán eritrocitos normales (con aspecto redondeado). · En la muestra con solución salina hipotónica no veremos nada (pues las células habrán reventado). Ni siquiera hace falta utilizar el microscopio con esta muestra: se ve que han reventado todos los eritrocitos porque es la única transparente -lo que demuestra que no hay células en suspensión- de las tres, aunque sí tenga cierto color sanguinolento debido a la hemoglobina. · En la hipertónica aparecerán los eritrocitos con la membrana plasmática arrugada, crenados. VI. ACTIVIDAD A DESARROLLAR · Dibuje lo observado y fundamente los resultados · Explique la importancia del uso de solución salina fisiológica e hipertónica en el tratamiento de la salud. · Ejemplos de 5 sustancias isotónicas, 5 hipertónicas y 5 hipotónicas. · En un cuadro compara las dos formas de transporte: el transporte activo-transporte pasivo e indique 3 ejemplos de cada uno.
La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección específica de moléculas. Estas tienen la capacidad de absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH, temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica), por lo que dicha técnica constituye un valioso instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas. II. OBJETIVOS:
Transmitancia y Absorbancia: Cuando un rayo de luz de una determinada lo onda de intensidad Io incide perpendicularmente sobre una disolución de un c químico que absorbe luz o cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la incidente (Ia) y dejará pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It La Transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It y la cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa normalmente en tanto por ciento: % T = It/Io x 100. La transmitancia nos da una medida física de la relación de intensidad incidente y transmitida al pasar por la muestra. La relación entre %T y la concentración no es lineal, pero asume una relación logarítmica inversa. La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/Io Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces A vale log 1 =
por la muestra más moléculas se encontrará -; y por último, depende de ε, una constante de proporcionalidad -denominada coeficiente de extinción- que es específica de cada cromóforo. Como A es adimensional, las dimensiones de ε dependen de las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones de ε resultan ser M-1·cm-1. Este coeficiente así expresado, en términos de unidades de concentración molar (o un submúltiplo apropiado), se denomina coeficiente de extinción molar (εM). Cuando, por desconocerse el peso molecular del soluto, la concentración de la disolución se expresa en otras unidades distintas de M, por ejemplo g·L-1, las dimensiones de ε resultan ser distintas, por ejemplo g-1·L·cm-1, y al coeficiente así expresado se denomina coeficiente de extinción específico (εs). La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c altos, ε varía con la concentración, debido a fenómenos de dispersión de la luz, agregación de moléculas. Espectrofotómetro UV-visible: La medición de absorbancia de la luz por las moléculas se realiza en unos aparatos llamados espectrofotómetros. Todos constan, según se indica en la figura, de: SISTEMA INTERNO DEL EXPECTROFOTÓMETRO PARTES DEL ESPECTROFOTÓMETRO
La principal función bioquímica de la glucosa es la de proporcionar energía para los procesos de la vida. El adenosín trifosfato ("ATP") es la fuente de energía universal para las reacciones biológicas. La oxidación de la glucosa por las vías glucolítica y del ácido cítrico es la fuente principal de energía para la biosíntesis del ATP. El sistema para regular los niveles de glucosa sanguínea funciona para lograr dos fines. El primero es para almacenar glucosa en exceso en relación a las necesidades corporales inmediatas en un reservorio compacto (glucógeno) y el segundo es para movilizar la glucosa almacenada de manera que mantenga el nivel de glucosa sanguínea. La regulación de la glucosa sanguínea es esencial para mantener al cerebro, cuya fuente energética primaria es la glucosa, abastecido por una cantidad constante de la misma. La función de la insulina es desviar la glucosa extracelular a los sitios de almacenamiento intracelular en la forma de macromoléculas (como el glucógeno, lípidos y proteínas). Es así que la glucosa es almacenada en tiempos de abundancia para los momentos de necesidad. En respuesta a la baja glucosa en sangre, como en períodos de ayuno, una serie de agentes hiperglucemiantes actúa en las vías metabólicas intermediarias para formar glucosa a partir de las macromoléculas almacenadas. De esta forma las proteínas y el glucógeno son metabolizados para formar glucosa- 6-fosfato (gluconeogénesis), la cual es hidrolizada a glucosa en el hígado y liberada a la sangre para mantener los niveles de glucosa sanguínea.
