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Enzimas, enzima cinética, Guías, Proyectos, Investigaciones de Bioquímica

Nohora Vegas Castro 2025 Bioquimica

Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2024/2025

Subido el 09/07/2025

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juliana-gomez-90 🇨🇴

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Universidad Nacional de Colombia
BIOQUÍMICA BÁSICA (Código: 1000042)
Nohora Angélica Vega Castro navegac@unal.edu.co
ENZIMAS_COENZIMAS
PREGUNTAS DE ESTUDIO
1. Al estudiar la cinética de inhibición de una enzima se han obtenido los siguientes
resultados:
[I] : concentración de inhibidor
Determinar gráficamente y por medio de las ecuaciones que las describen:
a. El valor de la Km
b. La velocidad Máxima ( Vmax)
c. El valor de la Km y/o el valor de la V máx en presencia de inhibidor
d. Describa que tipo de inhibición se presenta en este caso.
Nota: resolver haciendo la linealización de las curvas
2. Plantee cuatro diferencias entre las enzimas que siguen la cinética de
Michaelis Menten
y enzimas alostéricas. Complemente su respuesta con gráficas y ejemplos.
3. Cuando la enzima peroxidasa es calentada a 750C se pierde el 90% de su actividad en
10 minutos; cuando la enzima es incubada a la misma temperatura en presencia del sustrato
pierde solamente el 20% de actividad; cuando es incubada a la misma temperatura en
presencia del inhibidor pierde el solamente el 60% de actividad. ¿Porque cree usted que la
denaturación térmica es retardada en presencia de sustrato y de inhibidor? Qué diferencia
hay en el retardo de la denaturación que se da en presencia del sustrato y en presencia del
inhibidor .
4. En las siguientes reacciones busque el par específico, completando la primera columna
con la letra de la reacción de la segunda:
-----Hidrolasa
a) 2H2O2 2H2O + O2
-----Hidroxilasa
b) AH2 +B A + BH2
-----Isomerasa
C) AcetilCoA + H2O CoA + ácido acético
-----Catalasa
d) RH +1/2 O2 ROH
----Deshidrogenasa
e) D-lactato L-lactato
Sustrato (mM)
Vo (mol/min)
Inhibidor
Inhibidor
Sin Inhibidor
[I]=0,1 mM
[I]=1,0 mM
0.02
2,90
2,52
1,18
0.05
5,00
4,02
1,43
0.10
6,67
5,02
1,54
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¡Descarga Enzimas, enzima cinética y más Guías, Proyectos, Investigaciones en PDF de Bioquímica solo en Docsity!

Universidad Nacional de Colombia

BIOQUÍMICA BÁSICA (Código: 1000042)

Nohora Angélica Vega Castro navegac@unal.edu.co

ENZIMAS_COENZIMAS

PREGUNTAS DE ESTUDIO

  1. Al estudiar la cinética de inhibición de una enzima se han obtenido los siguientes resultados: [I] : concentración de inhibidor Determinar gráficamente y por medio de las ecuaciones que las describen: a. El valor de la Km b. La velocidad Máxima ( Vmax) c. El valor de la Km y/o el valor de la V máx en presencia de inhibidor d. Describa que tipo de inhibición se presenta en este caso. Nota: resolver haciendo la linealización de las curvas

2. Plantee cuatro diferencias entre las enzimas que siguen la cinética de Michaelis Menten

y enzimas alostéricas. Complemente su respuesta con gráficas y ejemplos. 3. Cuando la enzima peroxidasa es calentada a 75^0 C se pierde el 90% de su actividad en 10 minutos; cuando la enzima es incubada a la misma temperatura en presencia del sustrato pierde solamente el 20% de actividad; cuando es incubada a la misma temperatura en presencia del inhibidor pierde el solamente el 60% de actividad. ¿Porque cree usted que la denaturación térmica es retardada en presencia de sustrato y de inhibidor? Qué diferencia hay en el retardo de la denaturación que se da en presencia del sustrato y en presencia del inhibidor. 4. En las siguientes reacciones busque el par específico, completando la primera columna con la letra de la reacción de la segunda: -----Hidrolasa a) 2H 2 O 2 2H 2 O^ +^ O 2 -----Hidroxilasa b) AH 2 +B^ A^ +^ BH 2 -----Isomerasa C) AcetilCoA + H 2 O^ CoA + ácido acético -----Catalasa d) RH +1/2 O 2 ROH ----Deshidrogenasa e) D-lactato^ L-lactato Sustrato (mM) Vo (mol/min) Inhibidor Inhibidor Sin Inhibidor [I]=0,1 mM [I]=1,0 mM 0.02 2,90 2,52 1, 0.05 5,00 4,02 1, 0.10 6,67 5,02 1, 0.20 8,13 5,72 1, 0.50 9,09 6,25 1,

  1. Explique cuál es el modelo actual de catálisis enzimática? ¿cuáles son sus rasgos más característicos? Que diferencia se presentan con respecto a las enzimas de ajuste inducido

  2. Describa la curva de la cinética de una enzima a diferentes pHs?

  3. Cuál es el efecto de la temperatura en la cinética de una enzima. Ilustre su respuesta gráficamente.

  4. Como son las curvas cinéticas en presencia de inhibidores reversibles e irreversibles.

  5. Porque se deben hacer estudios cinéticos de enzimas?

  6. Coloque al frente de cada vitamina (columna Izquierda) la sustancia funcionalmente activa ( columna derecha : ____ niacina a) TPP ____ riboflavina b) NAD+ ____ Tiamina c) Coenzima A ____ ácido pantoténico d) FA

  7. Como es la estructura general de una coenzima? ¿Cuáles son sus componentes? Porque NAD+^ puede aceptar solamente un átomo de Hidrogeno mientras que la FAD puede aceptar dos átomos de Hidrógeno. En este último caso con qué clase de enzimas trabajan estas dos coenzimas. De un ejemplo.

  8. Como se clasifican las enzimas? Cuál es la nomenclatura que permite clasificar las enzimas. Explique en que consiste dicha nomenclatura.

  9. De acuerdo con las gráficas, indique cual curva (a, b ó c) indica la situación correcta: ________presencia de inhibidor competitivo ________Presencia de inhibidor no competitivo ________Presencia de inhibidor Acompetitivo ________Presencia de inhibidor Irreversible

  10. Defina los siguientes términos:

22.¿Qué pasaría si una enzima perdiera su estructura tridimensional por un cambio extremo de temperatura o pH? ¿Podría seguir funcionando? Explica por qué.

  1. A partir de los siguientes valores para una reacción catalizada por una enzima X
  • completar la tabla anexa
  • Realizar el gráfico de [S] vs V
  • Realizar el gráfico de 1/[S] vs 1/V
  • De este último gráfico, ajustar los valores a una línea recta por el método de los mínimos cuadrados o correlación. Escribir la ecuación de la recta y determinar los valores para Km y Vmax. Tenga en cuenta la ecuación de Lineweaver-burk.( usar Excel) [S] (mM) V (mM/sec) 1/[S] (mM-1) 1/V (sec/mM) 8,33 (^) 3,62 x10 -^6 5,55 (^) 3,39 x10 -^6 2,77 (^) 2,75 x10 -^6 1,38 (^) 1,99 x 10 -^6 0,83 1,49 x10 -^6

Nota: Recordemos como es la linearización de lineweaver-Burk

2. Un investigador con la esperanza de encontrar un fármaco para una patología X producida

por una enzima, realiza una serie de ensayos con dos inhibidores (A y B). Él mide la

velocidad inicial de una reacción catalizada por la enzima en ausencia y presencia del

inhibidor A, y en un procedimiento separado hace lo mismo con el inhibidor B. En cada caso,

la concentración del inhibidor fue de 8.0 mM (8.0x10-^3 M).

Los siguientes datos ( tabla ) se obtuvieron de los experimentos.

- Determine los valores de Km y Vmax de la enzima, a partir de la ecuación de la

linealización, describa los cálculos.

- Determine el tipo de inhibición para los compuestos A y B. Construya las gráficas

correspondientes en Excel utilizando la forma linealizada de la ecuación de Michaelis-

Menten (Lineweaver-Burk). A partir de estas gráficas, identifique el tipo de inhibición.

Calcule los valores de Vmax y Km en presencia y ausencia de los inhibidores, utilizando las

ecuaciones obtenidas de las rectas lineales.

- ¿Cuál fármaco (inhibidor A o B) que escogería usted, si se pretende lograr la mayor

inhibición sobre la enzima?