MATERIALES: bisturí, disolventes orgánicos., vortex, centrifuga, micropipeta,
solución BUFFER, microarray., escáner de microarrays, tubos de muestra
1. Colección de muestras: Se recolecto dos tipos de muestras de la persona,
con el bisturí abrimos el tejido y recolectamos las muestras de células sanas y
células infectadas de cáncer.
2. El ARN se extrae de ambas muestras del tejido usando disolventes orgánicos.
Se va a separar ADN, proteínas y otros componentes, dejando al final solo
ARN.
3. Se van a mezclar ambas muestras de tejido ( sanas e infectadas) en el vortex.
Cuando el tejido se disuelva se liberara el ARN.
4. Las muestras se colocan en la centrifuga la cual va ayudar a separar el ARN
del resto del contenido celular. Luego nos damos cuenta que el ADN no va a
permanecer en solución como el ARN debido a que las hebras de ADN son
más largas.
5. Se va a utilizar la micropipeta para que su punta entre al líquido del ARN de
ambas muestras para transferirla a un tubo limpio
6. Los resultados de las anteriores muestras fue que tienes varios tipos de ARN
como: ARN mensajero (ARNm) , ARN de transferencia (ARNt) y ARN
ribosómico (rRNA)
7. Las moléculas de ARNt y ARNr terminan en una secuencia de adenina la cual
es la cola poli-A las cuales se van a deshacer ya que solo el ARNm refleja la
expresión genética.
8. Se van a lavar las muestras de ARN sobre columnas llenas de pequeñas
perlas que se unirán a hebras de ARN que solo tengan una cola poli-A.y al final
solo queda el ARNm.
9. Se vierte la solución BUFFER sobre las columnas para separar el ARNm de las
perlas.
10. Se hara una copia de ADN del ARN, se va agregar color al ADN: verde para el
ARN de células sanas y rojo para las células cancerosas.
11.Los tubos ya no van a contener ARN, pero van a contener ADN
complementario (CDNA). Las moléculas de CDNA de células sanas son verdes
