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Apuntes y resúmenes de clase de la materia Técnicas moleculares, primer parcial
Tipo: Apuntes
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Moléculas de proteínas y otros contaminan tes del ADN
para evitar inhibición de la RCP molecular , constituy endo una opción ventajosa para los estudios molecular es FENOL- CLOROFOR MO
genómico Tejido de peces Sal Fenol- cloroformo Reduce las pérdidas de ARN total en la interfase y de esta forma aumenta la eficiencia en el proceso de extracción. El cloroformo desnaturaliza las proteínas, elimina los lípidos y solubiliza el fenol. la lisis total de las células y sus estructuras subcelulare s mediante el empleo de detergentes con la posterior eliminación de las proteínas mediante su extracción y la de component es lipídicos Alternativ a simple, fácil, rápida y no contamin ante que permite obtener ADN de buena calidad, en cantidade s suficiente s extracción manual también afecta el rendimiento por el exceso de manipulación y durante sus diferentes pasos: extracción fenol- cloroformo, centrifugació n, decantación, lavado, disolución, precipitación
con solventes orgánicos. en frío, entre otros, se puede degradar y perder parte del material. CONCLUSIONES Para la extracción de ADN genómico se utilizan diversos agentes químicos y/o físico que debiliten la pared y la membrana de la célula, ya que estas protegen el interior de la célula, lugar donde se encuentra en ADN, por lo que es importante saber las características morfológicas de estas para de esta manera poder determinar que técnica será la mejor para llevar a cabo el proceso de extracción. El objetivo es la obtención de moléculas aisladas con alto grado de pureza. REFERENCIAS 10 Métodos de Extracción de ADN [Internet]. Wakolatinamerica.com. [citado el 4 de septiembre de 2022]. Disponible en: https://www.wakolatinamerica.com/blog-reactivos/noticias-wako/post/10- metodos-de-extraccion-de-adn/ Alonso D. Cuantificación de ácido ribonucleico para la realización de la técnica de RT- PCR [Internet]. Sld.cu. 2013 [citado el 4 de septiembre de 2022]. Disponible en: http://www.revhematologia.sld.cu/index.php/hih/rt/printerFriendly/81/ Extracción de ADN de tejidos embebidos en parafina por Chelex-100. ADN de tejidos en parafina por resina quelante [Internet]. Patologia.es. 2006 [citado el 5 de septiembre de 2022]. Disponible en: http://www.patologia.es/volumen39/vol39-num3/39-3n07.htm
