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Preparación y observación de células sanguíneas - Prof. Smith, Cheat Sheet of Nationality law

Una práctica de laboratorio para la observación e identificación de los diferentes tipos de células sanguíneas, incluyendo glóbulos rojos, plaquetas y leucocitos (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos). Se describen los objetivos, los materiales necesarios y los procedimientos detallados de tres técnicas de tinción (may-grüwald giemsa, wright y hematoxilina-eosina) para la preparación de muestras de sangre y su observación al microscopio. Además, se incluyen preguntas de actividad complementaria relacionadas con los fundamentos de las técnicas, la morfología y funciones de las células sanguíneas. Este documento podría ser útil para estudiantes universitarios de carreras relacionadas con las ciencias biológicas y de la salud, como biología, medicina, enfermería o laboratorio clínico, que necesiten comprender la composición y características de la sangre a nivel celular.

Typology: Cheat Sheet

2023/2024

Uploaded on 04/27/2024

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MSc. DENIA PADILLA IZQUIERDO
PRÁCTICA N. 4
PREPARACIÓN Y OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS
OBJETIVOS
Mediante el uso del microscopio y técnicas de coloración adecuadas, los
estudiantes observaran e identificaran en tejido sanguíneo las diferentes clases de
células que lo constituyen y sus organelas.
INTRODUCCIÓN
Casi todas las células en la sangre son glóbulos rojos, cuya función principal es
transportar oxígeno de los pulmones a los tejidos. Sin embargo, aproximadamente
una de cada 500 células es un glóbulo blanco o leucocito; se llama “blanco” porque
no está teñido por la hemoglobina. Los leucocitos se dividen en granulocitos,
monocitos y linfocitos; los granulocitos se subdividen en neutrófilos, eosinófilos y
basófilos. Los leucocitos tienen diversas funciones; la más importante es proteger
al cuerpo contra la invasión por microorganismos patógenos. La sangre posee
también gran número de plaquetas, que a menudo se clasifican como leucocitos.
Sin embargo, no son células sino fragmentos diminutos de un tipo especial de
células de la médula ósea, llamada megacariocitos. Las plaquetas son
indispensables para la coagulación sanguínea.
MATERIALES
Microscopios
Portaobjetos
Cubreobjetos
Lanceta estéril desechable *
Algodón*
Alcohol*
Guantes*
Goteros
Alcohol metílico
Alcohol absoluto
Puente de coloración
Colorante de Wright
Colorante de Giemsa
Azul de metileno
Colorante Hematoxilina
Colorante Eosina
Agua destilada
Aceite de inmersión
Agua destilada
Papel Absorbente
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PRÁCTICA N. 4

PREPARACIÓN Y OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS

OBJETIVOS

Mediante el uso del microscopio y técnicas de coloración adecuadas, los estudiantes observaran e identificaran en tejido sanguíneo las diferentes clases de células que lo constituyen y sus organelas. INTRODUCCIÓN Casi todas las células en la sangre son glóbulos rojos, cuya función principal es transportar oxígeno de los pulmones a los tejidos. Sin embargo, aproximadamente una de cada 500 células es un glóbulo blanco o leucocito; se llama “blanco” porque no está teñido por la hemoglobina. Los leucocitos se dividen en granulocitos, monocitos y linfocitos; los granulocitos se subdividen en neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Los leucocitos tienen diversas funciones; la más importante es proteger al cuerpo contra la invasión por microorganismos patógenos. La sangre posee también gran número de plaquetas, que a menudo se clasifican como leucocitos. Sin embargo, no son células sino fragmentos diminutos de un tipo especial de células de la médula ósea, llamada megacariocitos. Las plaquetas son indispensables para la coagulación sanguínea. MATERIALES

  • Microscopios
  • Portaobjetos
  • Cubreobjetos
  • Lanceta estéril desechable *
  • Algodón*
  • Alcohol*
  • Guantes*
  • Goteros
  • Alcohol metílico
  • Alcohol absoluto
    • Puente de coloración
    • Colorante de Wright
    • Colorante de Giemsa
    • Azul de metileno
    • Colorante Hematoxilina
    • Colorante Eosina
    • Agua destilada
    • Aceite de inmersión
    • Agua destilada
    • Papel Absorbente

PROCEDIMIENTO

1. Técnica de May-Grϋwald Giemsa

  1. Bajo la orientación de su profesor, realice un frotis sanguíneo (ver fig.1), deje secar al aire, y haga una fijación de la muestra de la siguiente forma: coloque el portaobjetos sobre el puente de coloración o, luego agregue a la laminilla con el frotis 2-3 gotas de alcohol metílico absoluto durante 2 a 5 minutos. Es necesario este periodo de fijación para obtener una buena tinción.
  2. Luego le agrega unas gotas de azul de metileno y deja actuar de 5 a 15 minutos.
  3. Posteriormente sin lavar agregue a la laminilla unas del colorante Giemsa y se deja de 7 a 3o minutos.
  4. Lave con agua destilada inclinando la placa hasta eliminar el exceso de colorante; coloque la placa sobre un papel filtro o absorbente y deje secar al aire.
  5. Observe al microscopio con 400X aumento. Esquematice la forma de las células que identifique en sus observaciones Figura 1 2. Técnica de Wright
  6. Bajo la orientación de su profesor, realice un frotis sanguíneo (ver fig.1), deje secar al aire.
  7. Coloque la placa con el frotis en el puente de coloración y cubra la preparación con colorante de Wright y deje actuar por 5 minutos.
  8. Lave con agua destilada hasta que desaparezca la coloración, seque al aire libre y observe al microscopio. Esquematice la forma de las células que identifique en sus observaciones. 3. Técnica con hematoxilina
  9. Colocar el frotis de sangre sobre un puente de coloración y añada unas gotas de etanol absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparación.
  10. Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la desecación del colorante agregando más líquido.

polilobulados, contienen proteínas de propiedades bactericidas (fagocitan y destruyen células bacterianas). También denominados polimorfonucleares, de núcleo arriñonado, formando cuatro o cinco lóbulos; reciben por ello, el nombre de polimorfonucleares o, simplemente "polis". EOSINÓFILOS: Su nivel aumenta en las infestaciones por parásitos, en reacciones alérgicas, en el asma y en alguna patología del miocardio. Tienen el Núcleo bilobulado y granulación de tamaño medio, con fuerte apetencia por la eosina. Núcleo bilobulado y granulación de tamaño medio y fuerte apetencia por la eosina. BASÓFILOS: Los gránulos de los basófilos son gruesos pero escasos. Son células de unas 10 micras de diámetro y su núcleo tiene una forma que recuerda a un 5. Se originan en el mismo lugar que el resto de los granulocitos, y son los menos numerosos, ya que constituyen sólo el 0,5% del total. Tienen una activa participación en la respuesta alérgica a través de la liberación de histamina y otras sustancias químicas. LINFOCITOS: Los linfocitos son las células responsables de las respuestas inmunitarias. Se dividen en dos grandes grupos, linfocitos B y linfocitos T, según que estos progenitores linfoides maduren en la médula ósea (B) o en el timo (T),

respectivamente. No existe diferencia morfológica, observable a Microscopio óptico, entre ambos tipos de linfocitos. Son los glóbulos blancos más pequeños, con núcleo que ocupa casi la totalidad del volumen celular y no presentan granulación específica. MONOCITOS: Al igual que otros glóbulos blancos, los monocitos se originan en la médula ósea y luego entran en el flujo sanguíneo. En unas horas, emigran a los tejidos donde se convierten en macrófagos, y constituyen las células defensivas (fagocitos). Son de mayor tamaño que los linfocitos con núcleo redondo o arriñonado. PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

  1. Describa el fundamento de cada una de las técnicas empleadas en este laboratorio.
  2. Escriba el color de los núcleos de los leucocitos con cada una de las técnicas empleadas.
  3. Explique ¿qué tipo de técnica de coloración empleó?
  4. ¿Cuál es la razón por la cual durante una infección se incrementa el número de leucocitos en la sangre?
  5. ¿Qué tipo de células sanguíneas están más implicadas en la inmunidad de los organismos?
  6. ¿Cuáles células de la sangre son las primeras en atacar las bacterias en una infección?
  7. ¿Por qué los eritrocitos no poseen núcleos? ¿Cuál es el contenido del eritrocito que se combina fácilmente con el O 2 y CO 2?
  8. ¿Por qué cree usted que el hombre tiene un número mayor de eritrocitos por mm3 de sangre que la mujer? Explique.
  9. ¿Explique para qué otro tipo de células se pueden emplear las técnicas anteriormente señaladas?
  10. Dibuje sus observaciones, indique en ellas las estructuras celulares observadas.